预期用途

是一种经过认证的校准溶液，专为PTX2的分析方法开发和准确定量而设计。CRM-PTX2-b的浓度使其适合于制备用于校准液相色谱（LC）和液相色谱-质谱（LC-MS）仪器的稀释系列，以及用于回收实验的贝类对照样品的加标。

CRM的准备

是在新西兰Cawthron研究所从一个浮游植物水华中分离出来的，那里的尖脊藻是主要物种。2001年2月初，在新西兰布勒湾海岸3-4公里处采集了浮游植物，并通过前面描述的一系列色谱步骤进行了纯化[2]。通过将纯化的PTX2溶解在CD3OH（~4mM）中来制备储备溶液。然后通过定量NMR测定该储备溶液中PTX2的浓度[5]，之后通过在脱气的高纯度甲醇中准确稀释PTX2储备溶液并制备最终体积为2L来制备CRM溶液。将该溶液用Teflon搅拌棒和磁力搅拌器充分混合，同时在氩气氛下的冰浴中冷却。将等分试样分配到琥珀色玻璃安瓿中，并在氩气下火焰密封。然后对安瓿进行标记、包装，并立即转移到-80°C下长期储存。每个安瓿含有大约0.5毫升溶液。

结构确认和纯度评估

通过1H核磁共振（NMR）（图1）和LC-MS/MS证实了用于制备CRM-PTX2-b的PTX2的结构和纯度。产物离子光谱显示出PTX2的碎裂。LC-MS还用于估计PTX2-b储备溶液的一般纯度（柱：2.5µm Luna C18（2），100×2 mm；水（A）、分别含有2mM甲酸铵和50mM甲酸的乙腈/水（95/5）（B）（pH 2.3）；以200µL/min的速度在15分钟内达到5至100%的B+20°C柱温）。观察到一种部分溶解、未鉴定的异构体和PTX2c（图2）。使用等度LC法（柱和流动相如上；55%B，250µL/min；+20°C柱温），杂质相对于PTX2的保留时间分别为1.07和2.05。当在等度洗脱和选定离子监测（SIM）条件下监测时，CRM溶液含有约2.5%的未解析异构体和2.6%的PTX2c。这些次要化合物的比例仅作为信息值提供，未经认证。

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