产品时间:2022-03-04
NIBSC 98/582 催乳素(WHO国际标准品)其中含有在鼠 C127 细胞中表达的重组人催乳素的非糖基化成分 (1)。该制剂经国际合作研究分析,并于 2001 年 11 月被世界卫生组织生物标准化专家委员会确定为第一个用于免疫测定的人类催乳素、重组、非糖基化的 WHO 参考试剂
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世界卫生组织参考试剂
催乳素(人,重组,非糖基化)
免疫测定
NIBSC 98/582
酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb
二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。
四.异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)
五.表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。
七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。