产品时间:2022-03-03
NIBSC 99/710 抗 HIV-19 (1/5)(标准品) 自 1999 年以来一直投放市场。与英国抗 HIV-1 工作标准(代码 99/750)一起,它作为英国输血服务 2005 年第 7 版中引用的英国工作标准。
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CE 标志材料
五分之一的英国抗 HIV-1 工作标准
NIBSC 99/710-xxx
该材料是“附件 II 列表 A"IVD,符合“欧盟体外诊断医疗器械指令 98/79/EC"的要求。
酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb
二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。
四.异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)
五.表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。
七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。